Naudan tuberkuloosivasta -aine ELISA -pakkaus

Eritelmä

BTB AB ELISA

Tarkoitettu käyttö: Naudan tuberkuloosivasta -aine ELISA -havaitsemispakkaus on tarkoitettu naudan tuberkuloosin määrittämiseen

Vasta -aine naudan seerumissa Mycobacterium bovisista in vitro.

Testiä käytetään arvioimaan naudan tuberkuloosin tartunta. MPB 70- MPB83 Chimera -rekombinantti sovellettiin tässä testissä.

Näyte: seerumi

Vaaditaan materiaaleja, mutta ei toimitettu:

Puhdistettu vesi

Pipetti

96- kaivo mikrolevylukija (450 nm)

Ajastin

Sentrifugi (4000 rpm)

Pesukone

Uuni (37 astetta)

Testimenettelyt ja tulkinta

Vaihe 1Testimenetelmä

1.1 Pesu liuoksen valmistus

Wpitoisuus wNeste:Ennen käyttöä pesu liuos tulee palauttaa huoneenlämpötilaan (20-25 aste) ja ravistettava tasaisesti, jotta se olisi tasainen. Sitten laimenna 20 kertaa väkevöity pesu liuos puhdistetulla vedellä (esimerkiksi 5 ml: n konsentroitu pesu liuos lisätään 95 ml: n puhdistettuun veteen), sekoita kaivo ja laimennettua pesukestoa voidaan varastoida 2-8 asteeseen 7 päivän ajan.

1.2 Näytteen valmistelu

① Koko eläinveri otettiin, sentrifugoitiin nopeudella 4000 rpm 10 minuutin ajan ja supernatantti kerättiin. Seerumi voidaan myös hyytyttää luonnollisesti ilman hemolyysiä.

② Laimenna seeruminäyte 1: 100 (lisää 2UL -seeruminäyte 198UL -näytteen laimennelmiin) ja sekoita huolellisesti.

Huomaa: Negatiivisia ja positiivisia kontrolleja ei tarvitse laimentaa.

1,3 entsyymin konjugaattivalmiste

Laimenna entsyymikonjugaatti 1: 200 (lisää 5UL -entsyymikonjugaatti (X100) - 995UL -näytteen laimennus) ja sekoita huolellisesti.

1.4 Testimenettely

①AKA ENZYM -etiketti mikrolevy (näytteiden lukumäärän mukaan voidaan purkaa ja käyttää useita kertoja), lisää laimennetun seerumin 100UL 100UL -entsyymimerkin mikrolevylle, aseta kaksi kaivoa kumpikin negatiivisille ja positiivisille näytteille ja lisää 100UL: lle negatiiviset ja positiiviset kontrollit reaktioon hyvin. Ravista näyte varovasti kaivossa, käyttämällä tiivistyslevyn kalvoa levyn peittämiseen ja inkuboi 37 asteessa 30 minuutin ajan.

②PEN SUOJAUSKUVA, PAIKKAA liuosta levyn kaivoon, lisää 300 ui työpitoisuuspesukonsestimeen jokaiseen kaivoon ja hävitä sitten neste kaivoon. Toista yllä olevat vaiheet viisi kertaa ja lopulta kuivaa puhtaalla imukykyisellä paperilla.

③Add 100 ui entsyymikonjugaattia jokaiseen kaivoon, peitä levy ja inkuboi 37 asteessa 45 minuutin ajan.

④PEN SUOJAUSLAIKKA -KALLA, PUNTAA liuosta levyn kaivoon, lisää 300 ui työpitoisuuspesukonsestimeen jokaiseen kaivoon ja hävitä sitten neste kaivoon. Toista yllä olevat vaiheet viisi kertaa ja lopulta kuivaa puhtaalla imukykyisellä paperilla.

⑤Add 100 ui -substraattiliuos jokaiseen kaivoon, peitä levy ja inkuboi 10 minuutin ajan 37 asteen päässä valosta.

⑥Add 50 ui Stop -liuos jokaiseen kaivoon ja määritä tulos 5 minuutin sisällä.

Vaihe 2 Tulosten tulkinta

Kunkin kaivon OD450 -arvo luettiin 96- kaivon mikrolevylukijalla.

2.1 Validointi

Negatiivisen kontrollin keskimääräinen OD450NM -arvo oli<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Laskentamenetelmä

Laske jokaiselle näytteelle S/P seuraavasti korjattujen näytteiden ja ohjausarvojen avulla:

2.3 Tuloksen tulkinta

Kun S/P<0.25, it is judged as negative.

Kun S/P suurempi tai yhtä suuri kuin 0. 30, sitä pidetään positiivisena.

Kun 0. 25 pienempi tai yhtä suuri kuin s/p<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Suositut Tagit: Naudan tuberkuloosivasta -aine Elisa Kit, Kiinan naudan tuberkuloosivasta -aine ELISA Kit -toimittajat, valmistajat, tehdas